1 原理及适用范围

大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一，目前已被广泛应用于食品卫生检验工作中。大肠菌群多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方，大肠菌群数的高低，表明了食品及食品生产过程中受污染的程度。大肠菌群测试片含有选择性培养基、大肠菌群特异性半乳糖苷酶的显色指示剂和高分子吸水凝胶，运用微生物测试片专有技术，做成一次性快速检验产品。本产品适合于食品、饮用水及原料中大肠菌群的计数。执行标准：食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数（GB 4789.3）。

2 操作方法

2.1  样品处理：取样品 25 mL（g）放入含有225 mL灭菌磷酸缓冲液稀释液（或生理盐水）的取样罐或均质杯内，制成1:10的样品匀液，用1mL灭菌吸管吸取1:10样品匀液1mL，注入含有9mL稀释液的试管内，振摇后成为1:100的样品匀液， 以此类推，每次换一支吸管。

2.2  接种：一般食品选2~3个适宜的稀释度进行检测，含菌量少的液体样品（如饮用纯水和矿泉水等）可直接吸取原液进行检测。将大肠菌群测试片置于平坦实验台面，翻开测试片盖膜，用无菌吸管吸取1mL样品匀液均匀地滴加到纸片上，等待纸片完全吸收液体，慢慢放下盖膜，每个稀释度接种两片。同时做一片空白阴性对照。

2.3  培养：将测试片叠在一起水平置于恒温培养箱内，堆叠片数不超过10片。培养温度为36℃±1℃，培养15~24h。

3 计数原则及报告方式：

3.1  培养后纸片上的蓝色菌落为大肠菌群菌落，选择菌落数在15 CFU~150 CFU之间的纸片进行计数。

3.2  若两个稀释度的菌落数均在15 CFU~150 CFU之间，则取其平均菌落数乘以稀释倍数报告之，即为每毫升（或每克）样品中的大肠菌群菌落数；

3.3  如果所有稀释度的测试片上的菌落数都小于15 CFU，则计数稀释度最低的测试片上的平均菌落数乘以稀释倍数报告之；

3.4  如果所有稀释度的测试片上均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数报告之；

3.5  如果最高稀释度的测试片上的菌落数大于150 CFU个时，计数最高稀释度的测试片上的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。报告单位以CFU/mL（或CFU/g）表示。

4 附加说明

4.1  大肠菌群测试片不但可以大大缩短检测时间，而且检测结果与传统方法很接近，符合率可达90％左右。